ForHosting KIT · أدوات المطورين

حساب تركيز DNA مزدوج السلسلة بوحدة ng/µL من A260

تحوّل حاسبة تركيز DNA مزدوج السلسلة هذه قراءة الامتصاص عند 260 nm إلى نانوغرام لكل ميكرولتر، مع تصحيح النتيجة بحسب التخفيف.

● Betaمجاني · داخل متصفحك
استخدمها من الويبAPIالبريدTelegramالتطبيق قريبًا

وهي تطبق المعامل المتعارف عليه: تمثل قيمة A260 البالغة 1.0 تركيزاً قدره 50 ng/µL عند طول مسار ضوئي يساوي 1 cm. أدخلوا قيمة A260 المقاسة ومعامل التخفيف الكلي لاستعادة التركيز التقديري للعينة الأصلية. الحساب حتمي وواضح ومناسب لإجراءات القياس الروتينية للأحماض النووية.

أدخلوا القراءة التي قاسها الجهاز فعلياً

استخدموا قيمة الامتصاص المعروضة عند 260 nm للجزء الذي وُضع في مقياس الطيف الضوئي أو جهاز قياس الأحجام الدقيقة. تتطلب الحاسبة قيمة رقمية غير سالبة، وتفترض أن القراءة مكافئة لمسار ضوئي طوله 1 cm، وهي القاعدة التي يقوم عليها معامل التحويل القياسي لـ DNA مزدوج السلسلة. تطبّع أجهزة كثيرة لقياس الأحجام الدقيقة قيمة الامتصاص المعروضة إلى هذا المسار تلقائياً؛ لذلك راجعوا تقرير الجهاز أو طريقة القياس عند الشك. لا تدخلوا تركيزاً حسبه الجهاز، فهذه الأداة تبدأ من الامتصاص نفسه. إذا قيستم العينة من دون تخفيف، فاتركوا معامل التخفيف عند 1. يُفضل استعمال قراءة مصححة بعينة فارغة، لأن امتصاص المحلول المنظم أو الكوفيت أو سطح القياس قد يرفع التقدير. تُرفض القراءات السالبة بدلاً من تحويلها إلى تركيز سالب مضلل من الناحية الفيزيائية. تصف النتيجة التركيز الكتلي المستنتج من A260، لكنها لا تؤكد بصورة مستقلة أن كل المادة الممتصة هي DNA سليم مزدوج السلسلة.

طبّقوا معامل التخفيف الكامل مرة واحدة

يعيد معامل التخفيف حساب تركيز العينة الأصلية انطلاقاً من الجزء المخفف الذي جرى قياسه. عند مزج جزء واحد من العينة بتسعة أجزاء من المخفف، يصبح الحجم الكلي عشرة أجزاء، ولذلك أدخلوا 10. ولتخفيف بنسبة 1:20 أدخلوا 20. إذا أُجريت خطوات تخفيف متتالية، فاضربوا معاملاتها قبل إدخال القيمة؛ فتخفيف بمقدار عشرة أضعاف يتبعه تخفيف بمقدار خمسة أضعاف يعطي معاملاً كلياً قدره 50. تضرب الحاسبة قيمة A260 المقاسة في 50 ng/µL لكل وحدة امتصاص، ثم في معامل التخفيف الكلي. تجنبوا تطبيق التصحيح مرتين. إذا كان برنامج الجهاز قد صحح قيمة الامتصاص المعروضة بحسب التخفيف، فاستخدموا 1؛ أما إذا كان يعرض القراءة الخام للجزء المخفف، فاستخدموا المعامل الكلي الفعلي. إن تسجيل التخفيف مع النتيجة يجعل الحساب قابلاً لإعادة الإنتاج ويساعد على التمييز بين انخفاض الامتصاص المقاس وانخفاض التركيز في الأنبوب الأصلي.

فسّروا التقدير ضمن سياقه الكيميائي الحيوي

يتبع التركيز الناتج العلاقة المتعارف عليها لـ DNA مزدوج السلسلة: يساوي التركيز بوحدة ng/µL قيمة A260 مضروبة في 50 ثم في معامل التخفيف. وهذه العلاقة عملية لأن 1 ng/µL يساوي عددياً 1 µg/mL، فلا يلزم تحويل إضافي للوحدات. غير أن قياس الامتصاص ليس انتقائياً لـ DNA مزدوج السلسلة؛ إذ يمكن أن يسهم RNA والأحماض النووية أحادية السلسلة والنيوكليوتيدات الحرة والفينول ومركبات أخرى في الامتصاص عند 260 nm أو بالقرب منه. قد تكون نسب النقاوة A260/A280 وA260/A230، والعينة الفارغة المناسبة، واختبار فلوري خاص بـ DNA مزدوج السلسلة ضرورية عندما تكون الانتقائية أو الدقة عند التركيزات المنخفضة مهمة. كذلك لا تقيّم الحاسبة التجزؤ أو قابلية التضخيم أو السلامة الحيوية. تعاملوا مع الناتج بوصفه تقديراً للتركيز الكتلي مشتقاً من A260 وفق قاعدة المسار البالغ 1 cm. وفي التفاعلات اللاحقة، وازنوا النتيجة مع متطلبات الاختبار والنقاوة المتوقعة ونطاق الدقة العملي للجهاز، ولا تعتمدوا على الرقم المحسوب وحده.

استعادة تركيز المحلول الأصلي

حوّلوا امتصاص جزء مخفف إلى التركيز التقديري بوحدة ng/µL داخل الأنبوب الأصلي.

تحضير كمية موحدة من DNA

قدّروا التركيز قبل حساب حجم العينة اللازم لتفاعل PCR أو الهضم أو الربط أو تحضير المكتبة.

التحقق من حسابات الجهاز

أعيدوا إجراء تحويل A260 المتعارف عليه بصورة مستقلة، ووثقوا الامتصاص والتخفيف والمعامل المطبق.

ما المعادلة التي تستخدمها الحاسبة؟

تستخدم المعادلة: التركيز (ng/µL) = A260 × 50 × معامل التخفيف. والعدد 50 هو المعامل المتعارف عليه لـ DNA مزدوج السلسلة عند مسار ضوئي طوله 1 cm.

ما معامل التخفيف الذي ينبغي إدخاله؟

أدخلوا نسبة الحجم الكلي بعد التخفيف إلى حجم العينة. استخدموا 1 من دون تخفيف و10 لتخفيف بعشرة أضعاف، واضربوا معاملات خطوات التخفيف المتتالية.

هل يلزم التحويل من µg/mL إلى ng/µL؟

لا. الوحدتان متكافئتان عددياً، ولذلك فإن نتيجة قدرها 25 µg/mL تساوي أيضاً 25 ng/µL.

هل يمكن أن ترفع الملوثات النتيجة؟

نعم. قد ترفع التقدير أي مادة تمتص الضوء بالقرب من 260 nm. وتوفر نسب النقاوة والاختبار الفلوري الخاص بـ DNA مزدوج السلسلة أدلة إضافية.

هل يمكن استعمالها مع RNA أو DNA أحادي السلسلة؟

ليس بالمعامل نفسه. هذه القدرة مهيأة لـ DNA مزدوج السلسلة، أما أنواع الأحماض النووية الأخرى فلها معاملات A260 متعارف عليها ومختلفة.

كم تبلغ تكلفة الحساب عبر API؟

تبلغ تكلفة كل طلب API مقدار $0.002. ويمكن أيضاً تنفيذ الحساب الحتمي نفسه في المتصفح.

كل ما في هذه الصفحة متاح برمجيًا. هذا القسم موجّه للفرق التقنية التي تريد ربط الأداة بأنظمتها الخاصة؛ بقية المستخدمين يمكنهم استخدام الأداة أعلاه مباشرة دون الحاجة لقراءة ما يلي.

POSThttps://api.kit.forhosting.com/bio/dsdna-ng-per-ul

صادِق على طلبك بترويسة Bearer، وأرسل طلب POST واحدًا لتدخل مهمتك قائمة التنفيذ فورًا؛ ثم تستلم النتيجة عبر webhook أو رابط موقّع.

curl -X POST https://api.kit.forhosting.com/bio/dsdna-ng-per-ul \
  -H "Authorization: Bearer $KIT_KEY" \
  -H "Content-Type: application/json" \
  -d '{"absorbance_260":0.24}'
{
  "absorbance_260": 0.24
}
{
  "task_id": "tsk_a1b2c3d4e5f6a1b2c3d4e5f6",
  "type": "bio.dsdna_ng_per_ul",
  "status": "queued",
  "_links": {
    "result": "/tasks/tsk_…/result"
  }
}

الواجهة غير متزامنة: تستلم task_id فور الإرسال، ويمكنك الاستعلام عن الحالة بمعدل طلب واحد في الثانية.

لكل طلب$0.002

السعر معلن كما تراه: لا tokens ولا نظام نقاط؛ وإن فشلت المهمة فلن تُحاسَب عليها.

HTTPالرمزالمعنى
401unauthorizedمفتاح الوصول مفقود أو غير صالح؛ تحقق من ترويسة Bearer في طلبك.
402insufficient_balanceرصيدك لا يكفي لتنفيذ هذه المهمة؛ أعد شحن الرصيد ثم أعد المحاولة.
404unknown_typeنوع المهمة المطلوب غير موجود في الكتالوج — راجع الاسم المرسل في الطلب.
429rate_limitedتجاوزت الحد المسموح من الطلبات؛ انتظر قليلًا ثم أعد المحاولة.

اطّلع على توثيق KIT الكامل ←